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準格爾雅羅魚

mtDNA分析

1

采集時間:1984

樣品來源:新疆賽里木湖

取樣部位:肌肉組織

樣本數:3尾巴

實驗技術:PCR擴增

目的基因mtDNA Cytb

引物信息L147245 G A C T T G A A A A A C C A C C G T T G 3

H151495 C C T C A GA A G G A T A T T T GT C CTC3

擴增條件:

擴增反應總體積為50微升,其中含有50 ng的模板DNA2.5 UTaq DNA聚合酶,1×buffer,每種引物濃度分別為02 μmolLdNTP濃度為100μmolLMg 濃度為15 mmolLPCR擴增反應在PE PTC100 熱循環儀上進行。反應條件為:95 2 min后進行36個循環94 30 S49 30 S72 1 min。之后,反應72延伸10 min4結束。

擴增片段大小:489bp

圖片說明:準格爾雅羅魚等三種雅羅魚mtDNA Cytb擴增結果

參考文獻:

胡文革,段子淵,王金富等. 新疆3種雅羅魚線粒體DNA細胞色素b序列的差異與系統進化 [J]. 動物學雜志, 2005, 40 (3) 6 .

2

采集時間:1984

樣品來源: 新疆賽里木湖

取樣部位:肌肉

樣本數:3

實驗技術:PCR擴增

目的基因mtDNA D-loop

引物信息:

P2-U(5’ -TTAACTCCCACCCCTGGCT-3’ )

P1-L(5’ –CACGTTCTCGAACCTTCCTT-3’


擴增條件:

擴增反應總體積為50 uL,其中含有50 ng的模板DNA16 UTaq DNA聚合酶,1 X Bufer,每種引物濃度分別為0.2μmolLdNTP濃度為100pmolLMg離子濃度為1.5 pmolLPCR擴增反應在PE PTC-100 熱循環儀上進行。反應程序為:95 2 min94 30 S51 30 S72 1 min 30 S,進行35個循環;最后再72℃延伸10 min4℃結束。

擴增片段大小:827bp

參考文獻:

胡文革,段子淵,王金富等. 新疆3種雅羅魚線粒體DNA控制區序列的差異和系統進化關系 [J]. 遺傳學報, 2004, 31 (9) 6 .


染色體

采集地點:新疆,準格爾盆地,精河

取樣部位:腎

取樣數量:10

檢測單位:石河子大學生命科學學院

實驗方法:體內注射小牛血清和秋水仙素短期培養,經低滲、固定、低片,干凍玻片制片,吉姆薩染色。

圖片說明:染色體核型

染色體數:2n=50

核型方式:2n=18m+14sm+6st+12t


 
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